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微生物菌種保存方法之載體保存法即將微生物吸附在適當(dāng)載體上進行干燥保存的方法。常用的有方法包括以下幾種，如：①土壤保存法：主要用于能形成孢子或孢囊的微生物菌種的保藏。方法是在滅菌的土壤中加入菌液，立即在室溫下進行干燥或使菌體繁殖后再干燥，然后冷藏或在室溫下密封保存。保存用的土壤原則上以肥沃的耕土為宜，土壤需風(fēng)干、粉碎、過篩和滅菌。使微生物在土壤中繁殖后進行干燥保存的方法是：取適量土壤(5克)，置于塞有棉塞的試管中，加水或加入充分稀釋的液體培養(yǎng)基(以含水量為土壤大持水量的60%為...

細胞復(fù)蘇凍存注意事項凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融當(dāng)細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細胞凍存器當(dāng)溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當(dāng)溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當(dāng)溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2....

菌種保存有哪些注意事項從事菌種工作方面的朋友們一定知道，關(guān)于菌種的保藏是一件十分復(fù)雜的事情。那么究竟如何獲得的菌種保存效果呢?主要注意的有三個方面。*就是菌種在保存之前的狀態(tài)。絕大多數(shù)的菌種，保存的都應(yīng)該十它的休眠體，比如說孢子或者是芽孢。而且用來保存的孢子或者是芽孢，應(yīng)該采用的是新鮮的斜面上生長的非常豐滿的培養(yǎng)物。而菌種培養(yǎng)的時間和溫度都會影響到菌種的保存質(zhì)量。如果說培養(yǎng)時間太短，那么保存的時候就容易死亡。而培養(yǎng)的時間如果太長，又容易使菌種的生產(chǎn)性能發(fā)生衰退。一般來說，溫度...

人前列腺癌細胞；LNCaP特征特性該細胞由HoroszewiczJS于1977年從一名50歲的明確診斷為轉(zhuǎn)移性前列腺癌的白人男性患者的左鎖骨上淋巴結(jié)細針穿刺的活體組織中分離建立的。5-α-雙氫睪酮可影響該細胞的生長和酸性磷酸酶的產(chǎn)生。該細胞不形成均一的單層而是成簇生長，所以傳代的時候要反復(fù)吹打形成單個細胞；該細胞貼壁不牢，達不到匯合狀態(tài)，而且會使培養(yǎng)基迅速變酸；傳代后48h內(nèi)一定要保持培養(yǎng)瓶靜止.如果此時挪動培養(yǎng)瓶，會使大部分細胞從瓶底脫落。如果出現(xiàn)此種情況，需要重新孵育24...

結(jié)腸癌細胞是一種成團、貼壁生長的細胞,如果狀態(tài)好的情況下,生長非常快，細胞形態(tài)是不太規(guī)則的三角形.在低濃度時，此細胞長梭型（不好描述），高濃度時長成一張地毯，后者才是狀態(tài)的。結(jié)腸癌細胞培養(yǎng)操作步驟：1．結(jié)腸癌細胞細胞用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30厘米處照射2-3小時；4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培...

細胞培養(yǎng)常用培養(yǎng)基及基本特性1、RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞，雜交瘤細胞的培養(yǎng)，是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium（MEM）也稱zui低必需培養(yǎng)基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，...

消毒滅菌對細胞株培養(yǎng)的重要性細胞株嚴格的消毒滅菌對保證細胞培養(yǎng)的成功是極為重要的，其方法分為物理法和化學(xué)法兩類。前者包括干熱、濕熱、濾過、紫外線及射線等，后者主要指使用化學(xué)消毒劑等。①熱滅菌：玻璃器皿，160~170℃，90~120min或180℃45~60min。②蒸氣滅菌：用于玻璃器皿、濾器橡膠塞、解剖用具、耐熱塑料器具、受熱不變性的溶液等，不同物品其有效滅菌壓力和時間不同，如培養(yǎng)用液、橡膠制品、塑料器皿等用68kPa(115℃)高壓滅菌10min;布類、玻璃制品、金屬器...

菌種是主要的生物資源，也是食用菌生產(chǎn)首要的生產(chǎn)資料。一個優(yōu)良的菌種被選育出來以后，必須保持其優(yōu)良性狀不變或盡可能地少變慢變，才不至于降低生產(chǎn)性能，能長期在生產(chǎn)中使用。因此，菌種保藏在食用菌生產(chǎn)上具有重要的意義。各種微生物由于遺傳特性不同，因此適合采用的保藏方法也不一樣。一種良好的有效保藏方法，首先應(yīng)能保持原菌種的優(yōu)良性狀長期不變，同時還須考慮方法的通用性、操作的簡便性和設(shè)備的普及性。下面介紹幾種常用的菌種保藏方法：（一）斜面低溫保藏法將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上，待菌種生長...