質控菌株中的培養(yǎng)基性能如何測試
培養(yǎng)基的用途之前介紹了很多,這次就不做介紹了,今天我們主要討論的是質控菌株中的培養(yǎng)基性能測試方法,因為這方面掌握不了,對微生物的批量生產是不負責任的。不同的培養(yǎng)基的使用用途都是不一樣的,而且根據不同的使用特點,它們的應用領域也都不一樣,下面就來針對大家所關心的培養(yǎng)基性能測試方法做一下深入的介紹,希望對大家在后期的實驗工作有些幫助。
1 測試菌株選擇 測試菌株是具有其代表種的穩(wěn)定特性并能有效證明實驗室特定培養(yǎng)基佳性能的一套菌株,應來自/國家標準菌種保藏中心ATCC標準菌株,菌株的選擇參考衛(wèi)生行業(yè)標準WS/T232-2002《商業(yè)性微生物培養(yǎng)基質量檢驗規(guī)程》。
2 定量測試方法 改良Miles-Misra法 測試菌株過夜培養(yǎng)物10倍遞增稀釋;測試平板和參照平板劃分為4個區(qū)域并標記;從高稀釋度開始,分別滴一滴稀釋液于試驗平板和對照平板標記好的區(qū)域;將稀釋液涂滿整個1/4區(qū)域,37°C培養(yǎng)18小時;對易計數(shù)的區(qū)域計數(shù),按公式計算生長率(生長率=待測培養(yǎng)基平板上得到的菌落總數(shù)/參考培養(yǎng)基平板上獲得的菌落總數(shù))。非選擇性培養(yǎng)基上目標菌的生長率應不低于0.7,該類培養(yǎng)基應易于目標菌生長;選擇性培養(yǎng)基上目標菌的生長率應不低于0.1 。
3 半定量測試方法 改進的劃線法接種法 平板分ABCD四區(qū),共劃16條線,平行線大概相隔0.5cm,每條有菌落生長的劃線記作1分,每個僅一半的線有菌落生長記作0.5分,沒有菌落生長或生長量少于劃線的一半記作0分,分數(shù)加起來得到生長指數(shù)G。目標菌在培養(yǎng)基上應呈現(xiàn)典型的生長,而非目標菌的生長應部分或*被抑制,目標菌的生長指數(shù)G大于6時,培養(yǎng)基可接受 。
4 定性測試方法 平板接種觀察法 用接種環(huán)取測試菌培養(yǎng)物,在測試培養(yǎng)基表面劃平行直線。按標準中規(guī)定的培養(yǎng)時間和溫度對接種后的平板進行培養(yǎng),目標菌應呈現(xiàn)良好生長,并有典型的菌落外觀、大小和形態(tài),非目標菌應是微弱生長或無生長。
以上這些有關質控菌株中的培養(yǎng)基性能測試方法大家在看的時候要多認真思考一下,而且由于菌株品種比較多,培養(yǎng)基的檢驗方法也都不同,具體的方法還是要根據事實情況來做決定。后期我們還會針對這方面的知識做一下深入的探討,有興趣的朋友可以持續(xù)關注我們的網站,到時再跟大家做分享,相信在我們的專家?guī)ьI下,大家的微生物知識理解會更加容易一些。