膠質(zhì)瘤細胞系是能夠連續(xù)傳代的細胞,不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細胞系。大多數(shù)二倍體細胞為有限細胞系。通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細胞株(CellStrain),也就是說,細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。
膠質(zhì)瘤細胞系的培養(yǎng)要點:
1、取材:材料主要來源于外科手術(shù)或活檢瘤組織,取材時避免用壞死組織,要挑選瘤細胞集中和活力較好的部位,瘤性轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)或胸腹水是較好的培養(yǎng)材料。取材后盡快培養(yǎng),因故不能立即培養(yǎng)者,可凍存。其培養(yǎng)方法及凍存方法同前述正常組織。
2、成纖維細胞排除:在腫瘤組織中?;祀s有一些成纖維細胞,培養(yǎng)時能與瘤細胞同時生長,并常壓過癌細胞,導(dǎo)致癌細胞生長受阻以至消失,應(yīng)仔細排除。排除方法常有:機械刮除法、反復(fù)貼壁法、消化排除法、膠原酶消化法等。
3、提高腫瘤細胞培養(yǎng)存活率和生長率
根據(jù)實驗經(jīng)驗,腫瘤細胞在體外不易培養(yǎng),建立能傳代的腫瘤細胞系更為困難。一般當(dāng)腫瘤組成或細胞被原代培養(yǎng)后,要經(jīng)過對新環(huán)境的適應(yīng)才能生長,因此不能局限于一般培養(yǎng)法,須采用一些特殊措施。如:用適宜底物,鼠尾膠原底層及飼細胞底層等。用細胞生長因子,根據(jù)細胞種類不同選用不同的促細胞生長因子,如胰島素、氫化可的松,雌激素等。也可以考慮動物媒介培養(yǎng)。